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OT即邻联甲苯胺(O-Tolidine)，是过氧化物酶的生色底物，在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化，形成鲜艳的蓝绿色可溶性产物。具有灵敏度高，快速等优点。是HRP结合物最常用的底物，在ELISA和免疫组织化学中应用比较广泛。

• 请使用完后将溶液A和溶液B盖子旋紧，以防止溶液挥发和与空气中的成分发生化学反应。
  
• 显色一般在室外温或37℃反应5min，再延长反应时间，会使本底值增高，影响实验结果的分析。可向每孔加入30μL的2M柠檬酸及时终止反应，这时溶液变成黄色，可以在405nm波长下检测。
  
• 显色工作液应现用现配，以免失效。显色后在40min内，及时检测结果，否则颜色会渐渐退去。
  
• 试剂有微量的毒性和腐蚀性，请戴好防护手套操作。
  
• 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算，为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能，将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
  
• 本试剂只能够用于体外实验，不能够用于临床、治疗和动物体内实验等目的，由此产生的后果概不承担责任。

• 显色前吸取10mL反应液移置一个15mL的干净瓶中，向其依次加入100μL溶液A和5μL溶液B并充分混匀。
  
• 分别向微孔中各加入100μL混合反应液，显色1～5min，这时蓝绿色产物出现。
  
• 用酶标仪在630nm处读取光吸收值。